人软骨肉瘤细胞 （SW-1353）

人软骨肉瘤细胞 (SW-1353)
细胞介绍：
SW-1353细胞源于1977年一个【gè】72岁【suì】白人，患者诊【zhěn】断为原发【fā】性二【èr】级软骨肉【ròu】瘤。
 
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO)，90%;胎牛血【xuè】清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳【tàn】，5%。温【wēn】度：37°C，培养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液的冻存管迅速放入【rù】37°C水浴中（水【shuǐ】面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备【bèi】好的【de】含有【yǒu】4mL培养基【jī】的15ml离心管【guǎn】中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹【chuī】匀。然后将所【suǒ】有细【xì】胞悬【xuán】液移入含有5ml培养【yǎng】基的培养【yǎng】瓶中培【péi】养【yǎng】过夜。第二【èr】天换液并检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人软骨肉瘤细胞 (SW-1353)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁【měi】离子【zǐ】的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱中消化9-21分钟，然后在显微镜下【xià】观察细【xì】胞消化情【qíng】况，若细胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅速拿【ná】回操作台【tái】，轻【qīng】敲几下培【péi】养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。轻轻吹打后吸【xī】出【chū】，移入【rù】15ml离【lí】管中，在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，加入lmL培养【yǎng】液后吹匀。移入到事【shì】先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶【píng】中或【huò】含有【yǒu】14ml培养基的【de】T-75培养【yǎng】瓶【píng】中【zhōng】培【péi】养。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良好时【shí】，可进行【háng】细【xì】胞【bāo】冻存【cún】。贴壁细【xì】胞【bāo】冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化【huà】方法【fǎ】按照细【xì】胞传代【dài】方法的9-21步骤进行，后的重悬液使用【yòng】血清【qīng】。悬【xuán】浮细胞直接计【jì】数后离心，用血清重悬浮，加【jiā】DMSO至【zhì】终浓【nóng】度为10%。加入DMSO后迅速混【hún】匀，按每lml的数量分【fèn】配到冻【dòng】存管中【zhōng】。本公司【sī】按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发【fā】现干【gàn】冰己挥发干净、冻【dòng】存管瓶【píng】盖脱落、破【pò】损及细胞有污染， 请立【lì】即与我们电联。
所【suǒ】有动物细【xì】胞【bāo】均视为【wéi】有潜在的生物危害性，必须在二级【jí】生物安全【quán】台内操作， 并【bìng】请注【zhù】意防护，所有废液及接触过【guò】此细胞的器皿需要灭菌后【hòu】方能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：软骨肉瘤
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人软骨肉瘤细胞 (SW-1353)细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下【xià】确【què】认细【xì】胞【bāo】生长状态【tài】，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞【bāo】长满（90%以上）请及时进【jìn】行细胞传代，传代培养用6ml本公司附【fù】带的*培养基。
5.接到细胞次【cì】日，请检查细胞是否【fǒu】污【wū】染，若【ruò】发现污染或疑似污染，请及时与我【wǒ】们取得电联。
细胞用途：仅供使用。