人膀胱移行细胞癌细胞 （T24）

人膀胱移行细胞癌细胞 (T24)
细胞介绍：
该【gāi】细【xì】胞源自病人的【de】转移性【xìng】细胞腺癌，对T24和相关细胞株【zhū】有【yǒu】细胞毒性【xìng】，代【dài】时为19小时，含ras (H-ras)癌基因。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备【bèi】 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡【pú】萄【táo】糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气相【xiàng】：空【kōng】气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻【dòng】存管【guǎn】在【zài】37°C水【shuǐ】浴中迅速【sù】摇晃解【jiě】冻【dòng】，加入4mL培养基【jī】混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟【zhōng】，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后【hòu】将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细【xì】胞悬液加入l〇cm皿中，加入【rù】约【yuē】8ml培养基，培养过夜）。第【dì】二天换液并检查细胞密度。
 
人膀胱移行细胞癌细胞 (T24)细胞传代：如果细胞密【mì】度【dù】达【dá】80%-90%，即【jí】可进【jìn】行传代【dài】培养。弃去培【péi】养上清，用不【bú】含钙【gài】、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。力【lì】口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培【péi】养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱中消化【huà】9-21分钟【zhōng】，然后在显微【wēi】镜下观【guān】察细胞消化情【qíng】况，若细胞大部 分变圆并【bìng】脱落，迅速拿回操作台【tái】，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止【zhǐ】消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻【qīng】轻【qīng】打匀后吸出，在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的【de】比例分到新【xīn】的【de】含8ml培养【yǎng】基【jī】的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长状态良好时，可【kě】进行细【xì】胞【bāo】冻存【cún】。贴壁细胞冻存时，弃去培养基【jī】后【hòu】加【jiā】入【rù】少量胰【yí】酶【méi】，细胞变圆脱【tuō】落后，加入约【yuē】lml含【hán】血清的培养基后 加入【rù】冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干冰己挥【huī】发干净【jìng】、冻存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联。
所有动物【wù】细胞均视为有潜在的生物【wù】危害【hài】性，必须【xū】在二级生物安全台【tái】内操作，并请注【zhù】意防【fáng】护，所有废【fèi】液及接触过此细胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方【fāng】能丢【diū】弃。
 
细胞特性：
1)来源：膀胱；移行细胞癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T75瓶或者lmL冻存管包装
 
人膀胱移行细胞癌细胞 (T24)运输和【hé】保存：可选择干冰【bīng】运输及发【fā】送【sòng】复苏存活细胞方式：（1)干【gàn】冰运输，收到后立【lì】即转【zhuǎn】入液氮冻存或直接复苏；（2)存活细【xì】胞，收到后应继续生长【zhǎng】，传【chuán】代达到【dào】细【xì】胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作【zuò】见细【xì】胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。