木霉属通用PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：木霉属通用PCR检测试剂盒

英文名称：Trichoderma spp.PCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临【lín】用前【qián】15分钟内配制。每瓶【píng】以样【yàng】品【pǐn】稀释【shì】液稀释至0.5ml，盖好【hǎo】后【hòu】室【shì】温静置大【dà】约【yuē】10分钟，同时反复颠倒/搓动【dòng】以【yǐ】助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接【jiē】在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品【pǐn】稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配【pèi】制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上【shàng】述标准品【pǐn】加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中【zhōng】，混【hún】匀即【jí】可，其余浓度以此类推【tuī】。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：

1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、木霉属通用PCR检测试剂盒存放：样本在2~8℃条【tiáo】件下【xià】保【bǎo】存应不超过72h，-70℃以下可【kě】长期保存，但应【yīng】避免反复冻【dòng】融（zui多冻融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特【tè】异性：所【suǒ】有产品使用的引物【wù】均经过【guò】详尽的生物【wù】信息学分析，经过GenBank及【jí】自建庞大【dà】数据库的比对，确保所用的【de】每【měi】一条引物均为种属【shǔ】或血清型特【tè】异的基因序列区段，可实现【xiàn】对【duì】种属【shǔ】及血清型【xíng】的特异检测，特异性均达到100%。

2.重现性：该【gāi】系【xì】列所【suǒ】有产品均经【jīng】过【guò】大量实验菌株的验证，重现性为100%。

3.灵【líng】敏性【xìng】：该系列【liè】产【chǎn】品可实现对检测菌的高灵敏检测，当【dāng】样品中【zhōng】的浓度达到103cfu/ml时，可实现对【duì】其的直接检测，无需【xū】繁【fán】琐的增菌过【guò】程【chéng】。

4.实用性【xìng】：检测范围广，涵盖了对人【rén】体危害较为严重的【de】17种呼【hū】吸道及肠【cháng】道致【zhì】病【bìng】菌，可实现对临床样品及其他环【huán】境【jìng】取样的快速【sù】检测，整个检测【cè】过程为9-21个小时。

5.优势1：序列资源丰富，除GenBank公【gōng】布的序列外，公司还进行了大量【liàng】菌株【zhū】的【de】序列破【pò】译，从理论上保【bǎo】证所选引物【wù】具有良好【hǎo】的保守【shǒu】性和【hé】特【tè】异性。

6.优势2：该系列【liè】试【shì】剂【jì】盒均经过大量的保守性及【jí】特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试【shì】剂盒均经【jīng】过了20余【yú】种标准菌株和临床【chuáng】菌株【zhū】的保守性验【yàn】证及【jí】40余种近【jìn】缘标准菌株和临床【chuáng】菌株【zhū】的特异【yì】性验证，确【què】保在使用【yòng】过程中不会出现任何的【de】假【jiǎ】阳性及假阴性报【bào】告结【jié】果。

使用方法：

注：所有试【shì】剂使用前需【xū】*解冻，混合均匀，6,000rpm离【lí】心数秒后使用【yòng】。

1. 样本处理（样本处理区）

待【dài】检样本【běn】的【de】核酸提取【qǔ】可【kě】采用病毒RNA提取试剂盒或【huò】自动化核酸提取仪等【děng】，具体【tǐ】提取方法【fǎ】请参照相关说明书。阳性质控品及阴【yīn】性【xìng】质控品【pǐn】无需提【tí】取，可直接使用。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴性质控品+待【dài】检样本+阳【yáng】性质控品）PCR反【fǎn】应管，每管分别加【jiā】入FMD RT-PCR反应【yīng】液【yè】19μl、RT-PCR酶1 μl (也【yě】可【kě】根据每头【tóu】份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应【yīng】液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离心后分装【zhuāng】20 μl至【zhì】单个PCR反应管)。组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将【jiāng】所有PCR反应管于【yú】6,000rpm离心【xīn】30s，转移至样本【běn】处理区。

2.木霉属通用PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的【de】PCR反应【yīng】管中【zhōng】分别加入待检样本【běn】RNA提取物、阴性质控品和【hé】阳性质控品各5 μl，盖紧管盖，于【yú】6,000rpm离【lí】心10s，转【zhuǎn】移至【zhì】扩增区。