小鼠肾小球系膜细胞（SV40-MES-13）

小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)
细胞介绍
该细胞系来源于转染SV40的转基因小鼠的肾脏。
 
细胞特性
1)来源：肾小球，小鼠
2)形态：成纤维细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下【xià】确认细胞生长状态，去【qù】掉封【fēng】口膜并将【jiāng】T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细【xì】胞传代，传【chuán】代培养用6ml本公【gōng】司【sī】附带【dài】的*培养基。
5.接到细胞次日，请检【jiǎn】查【chá】细胞是否【fǒu】污染，若发现【xiàn】污染或疑似污染【rǎn】，请及时【shí】与我们取得【dé】电【diàn】联。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】培【péi】养基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium(CatalogNo_30-2002): Ham'sF12mediumwith14mMHEPES=3:l，即三份的DMEM，1份 Ham'sF12
混合培养基)，85%;胎牛血清，5%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二氧化碳，5%。温【wēn】度：37°C，培养箱湿【shī】度为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管迅【xùn】速放【fàng】入37°C水浴中（水面要【yào】低 于冻存【cún】管盖部）摇晃【huǎng】解【jiě】冻，移【yí】入【rù】事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心【xīn】 管中混合均匀。在1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟【zhōng】，弃去上清液，加入lmL培 养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然后将所有【yǒu】细【xì】胞【bāo】悬液移【yí】入含有【yǒu】5ml培养基的培养瓶中培养过夜。 第二天【tiān】换液并【bìng】检查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中【zhōng】，置【zhì】于37°C培
养箱中消【xiāo】化【huà】9-21分钟，然后【hòu】在显【xiǎn】微镜下观察细【xì】胞消化情况，若细【xì】胞大部分变圆并脱落【luò】，迅【xùn】速拿【ná】回【huí】操作【zuò】台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化【huà】。
轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管【guǎn】中【zhōng】，在1000RPM条件【jiàn】下离心4分【fèn】钟，弃去上清液【yè】，加入lmL培养【yǎng】液后吹【chuī】匀。
移入到事【shì】先准备【bèi】好的【de】含有5ml培养基的【de】T-25培养瓶【píng】中或含有14ml培养【yǎng】基的【de】T-75培养瓶中培养。
 
细胞冻存：待细胞生【shēng】长【zhǎng】状态【tài】良好时【shí】，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时，先要消化处理并【bìng】进行【háng】细胞计数。消化方法按【àn】照【zhào】细【xì】胞传代方法【fǎ】的【de】9-21步骤进行， 后的【de】重悬液使【shǐ】用血清【qīng】。悬【xuán】浮细【xì】胞直【zhí】接计数【shù】后离心，用血清重悬浮，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到冻【dòng】存管 中【zhōng】。本公司【sī】按每个冻存管细【xì】胞数【shù】目大于【yú】1X106个【gè】细【xì】胞冻存。
 
小鼠肾小球系膜细胞(SV40-MES-13)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰己挥发干【gàn】净【jìng】、冻【dòng】存【cún】管瓶盖脱落、破损及细胞有【yǒu】污染，请立即与我们电联【lián】。
所【suǒ】有动【dòng】物细胞均视为有【yǒu】潜在的生物危害性，必须在【zài】二级生物【wù】安全台内操作，并请注意防护，所有【yǒu】废【fèi】液及【jí】接触【chù】过此细胞的器皿需要灭菌后【hòu】方能丢弃。