奋森疏螺旋体PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：奋森疏螺旋体PCR检测试剂盒

英文名称：Borrelia vincentiPCR

准备物品：

清【qīng】理【lǐ】液（A）                                   毫升

染【rǎn】色【sè】液（t B）                                 微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解【jiě】液（tD）                                  毫升

产品【pǐn】说【shuō】明书                                     1份

注意事项：

1．基础程序；

2．扩增温度和延伸温度；

3．反应时间；

4．循环次数；

5．PCR 反应液的配制；

6．PCR技术的基本原理；

7．PCR的反应动力学；

8．PCR扩增产物；

9．PCR反应体系与反应条件。

反应五要素：

参加PCR反应【yīng】的【de】物质主【zhǔ】要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，奋森疏螺旋体PCR检测试剂盒PCR 产物的特【tè】异性取决于引物与模板DNA互补的程【chéng】度。理论上，只要知道任何一【yī】段【duàn】模板DNA序列， 就【jiù】能按其【qí】设计互补的寡【guǎ】核苷酸【suān】链做引物，利用PCR就可【kě】将模板DNA在体外大量扩【kuò】增。设计引物应遵循以下【xià】原【yuán】则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度【dù】： 以【yǐ】200-500bp为宜，特定条件下可扩增长【zhǎng】至10kb的【de】片段。

③引物碱基：G+C含量以9-20%为宜，G+C太少【shǎo】扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随【suí】机【jī】分【fèn】布，避免5个【gè】以【yǐ】上的嘌呤或嘧啶【dìng】核苷【gān】酸【suān】的成串【chuàn】排列。

④避【bì】免【miǎn】引物内部出现二级结【jié】构，避【bì】免两条【tiáo】引物间【jiān】互补，特别是3'端的互补，否则会【huì】形成引物二聚【jù】体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物【wù】3'端的碱基，特别是【shì】末及倒数第二【èr】个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基【jī】不配【pèi】对而【ér】导致【zhì】PCR失败。

⑥引物中有或能加【jiā】上合适【shì】的酶切【qiē】位【wèi】点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶【méi】切位点【diǎn】， 这对酶切分【fèn】析【xī】或【huò】分【fèn】子克隆很有好处。

⑦引物【wù】的【de】特异性【xìng】：引物应与核酸序列【liè】数据库的其它序列无明显同源性【xìng】。

引物【wù】量：每条引物的浓度【dù】0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量【liàng】产生所【suǒ】需要的【de】结果为好，引物浓度偏高会引【yǐn】起错配和非特【tè】异【yì】性扩增，且可增加【jiā】引物之间形成二聚体的机会。